你有没有试过同一批样本,三次重复Ct值偏差超1.5;同一样本不同批次反转录,结果天差地别,明明引物、反应体系都没问题,却怎么调都做不出稳定结果……
今天为大家解读一篇发表于《Nature》的研究论文《Climbing fibres recruit disinhibition to enhance Purkinje cell calcium signals》。该研究由哈佛医学院Wade G. Regehr团队完成,完美解决了小脑领域长期存在的经典悖论,把突触解剖、细胞生理、在体环路、功能学习串成完整故事。
做WB、IHC、IF反复翻车,杂带丛生、背景脏、特异性差?明明靶点清晰、操作规范,结果却一团乱麻,实验数据毫无说服力?
做 Western Blot 最闹心的,莫过于背景黑成锅底、目的条带弱到看不见。其实 90% 的信噪比翻车,都栽在封闭不到位、抗体孵育不规范这两步。
做PCR时,满心期待跑出清晰条带,结果凝胶上却出现一堆乱七八糟的非特异性条带、涂抹带或多余条带?别头疼,这其实是实验中常见的情况,今天就带大家深入排查原因,并奉上详细的解决方案!
做实验时最崩溃的莫过于:PCR跑胶一看,要么条带模糊、要么非特异性扩增扎堆,甚至干脆一片空白……明明步骤都对,问题到底出在哪?
WB实验里,抗体孵育是决定条带质量的关键步骤之一。孵育时间过短,可能导致信号弱甚至无信号;时间过长或温度不当,则容易引发非特异性结合,出现杂带或背景偏高。今天小T带你精准拿捏孵育条件,让条带清晰又漂亮!
德国癌症研究中心团队于2月13日在《Nature Genetics》发表一篇名为“Active repression of cell fate plasticity by PROX1 safeguards hepatocyte identity and prevents liver tumorigenesis”的研究,发现PROX1作为肝细胞特异性的“保护抑制因子”,通过抑制细胞命运可塑性来维持肝细胞特性并预防肝癌,为理解细胞命运调控和肝癌防治提供了新视角。