你有没有试过同一批样本,三次重复Ct值偏差超1.5;同一样本不同批次反转录,结果天差地别,明明引物、反应体系都没问题,却怎么调都做不出稳定结果……
大分子量蛋白常常因分子量大、空间结构复杂,在电泳、转膜、孵育等环节极易出现问题,常规WB流程根本hold不住!
今天为大家解读一篇发表于《Nature》的研究论文《Climbing fibres recruit disinhibition to enhance Purkinje cell calcium signals》。该研究由哈佛医学院Wade G. Regehr团队完成,完美解决了小脑领域长期存在的经典悖论,把突触解剖、细胞生理、在体环路、功能学习串成完整故事。
做WB、IHC、IF反复翻车,杂带丛生、背景脏、特异性差?明明靶点清晰、操作规范,结果却一团乱麻,实验数据毫无说服力?
各位科研 er,是不是还在为 PCR 反复失败而头秃?条带弥散、无扩增、杂带丛生…每一次跑胶都像开盲盒?别慌!今天就来拆解 PCR 成功的核心密码,让你的实验从此 “稳如老狗”!
做 Western Blot 最闹心的,莫过于背景黑成锅底、目的条带弱到看不见。其实 90% 的信噪比翻车,都栽在封闭不到位、抗体孵育不规范这两步。
做PCR时,满心期待跑出清晰条带,结果凝胶上却出现一堆乱七八糟的非特异性条带、涂抹带或多余条带?别头疼,这其实是实验中常见的情况,今天就带大家深入排查原因,并奉上详细的解决方案!
做实验时最崩溃的莫过于:PCR跑胶一看,要么条带模糊、要么非特异性扩增扎堆,甚至干脆一片空白……明明步骤都对,问题到底出在哪?
在生命科学研究领域,定量聚合酶链式反应(qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)是探究基因和蛋白表达水平的两大“利器”。
WB实验里,封闭环节是阻断非特异性结合、降低背景信号的关键一步,而封闭液的选择直接影响实验结果的准确性。今天就结合不同蛋白类型,拆解封闭液的选择逻辑,帮你避开常见问题。