你有没有试过同一批样本,三次重复Ct值偏差超1.5;同一样本不同批次反转录,结果天差地别,明明引物、反应体系都没问题,却怎么调都做不出稳定结果……
各位科研 er,是不是还在为 PCR 反复失败而头秃?条带弥散、无扩增、杂带丛生…每一次跑胶都像开盲盒?别慌!今天就来拆解 PCR 成功的核心密码,让你的实验从此 “稳如老狗”!
做PCR时,满心期待跑出清晰条带,结果凝胶上却出现一堆乱七八糟的非特异性条带、涂抹带或多余条带?别头疼,这其实是实验中常见的情况,今天就带大家深入排查原因,并奉上详细的解决方案!
做实验时最崩溃的莫过于:PCR跑胶一看,要么条带模糊、要么非特异性扩增扎堆,甚至干脆一片空白……明明步骤都对,问题到底出在哪?