全能型蛋白裂解液

【产品简介】 

全能型蛋白裂解液是一种改良型的细胞组织快速裂解液。全能型蛋白裂解液裂解 得到的蛋白样品可以用于常规的PAGE、Western和ELISA等实验。

本产品的主要成分1%NP-40 ,1%曲拉通以及含有EDTA，如果需要，可将多种酶抑制 剂添加到试剂中以防止蛋白质水解并维持蛋白质的磷酸化状态。

裂解得到的蛋白样品，含有较高浓度的去垢剂，不建议用 Bradford 法测定蛋白 浓度，可以选用 BCA 蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。

全能型蛋白裂解液采用改良配方，能有效抑制核酸沉淀的出现，可以进行免超声 操作。

【货    号】 P1067

【规    格】 100ml/瓶 

【保存条件】 -20℃保存，有效期为1年。

【使用说明】 

对于培养细胞样品：

溶液在使用前数分钟内加入相应量的PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM或者根据实验需 要加入适当的蛋白磷酸酶抑制剂混合物。

贴壁细胞：

计数后去除培养液，细胞刮收集细胞，200g离心5min，用PBS、生理盐水清洗多次。 按照2×106细胞约6孔板每孔加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数

下，使裂解液和细胞充分接触。置于冰上，于摇床上裂解30分钟。 悬浮细胞：

离心收集细胞，轻轻vortex或者弹击管底以把细胞尽量分散开。按照5×105细胞数每 孔加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液充分裂解细胞。裂解后应没有明显的细胞 沉淀。

对于组织样品：

1、把组织放于预冷的PBS或生理盐水中漂洗数次，将组织剪切成细小的组织碎片。 对于心脏，肾脏等含血量丰富的应多次洗涤，确保无血液干扰。

2、取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为lmM，或 者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。

3、称量组织，按照每20毫克组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，即组织 净重（mg）：裂解液（ul）=1:10的比例，然后立即进行匀浆。用玻璃匀浆器快速匀 浆，直至肉眼观察无明显组织块，然后冰上裂解15分钟左右，直至充分裂解。也可 以把组织样品冷冻后液氮研磨，研磨充分后加入裂解液进行裂解。

  4、充分裂解后，10000-14000g 4℃ 离心5-10分钟，取上清，即可进行后续蛋白分 析等操作。

【注意事项】

1.裂解样品的所有步骤都需要在冰上进行。

2.为了取得最佳的使用效果，尽量避免反复冻融，建议分装保存使用

3.为了您的身体安全及健康，请穿实验服及佩戴一次性手套操作。

4.本产品仅限于科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。