020-3107 8154
产品中心
- 产品参数
- 货号： P1003
- 商品名称： BCA蛋白浓度测定试剂盒
- 规格： 500次
- 价格： 300
BCA蛋白浓度测定试剂盒
【产品简介】
碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+，Cu+与BCA试剂形成紫色的络合物，测定其 在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。实现了蛋白 浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。
本试剂盒检测浓度下限达到 25µg/ml，最小检测蛋白量达到0.5µg，待测样品体积为1-20µl。在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。
【货 号】 P1003
【规 格】 约500次
【保存条件】 室温保存，蛋白标准配制成溶液后-20ºC分装冻存。
【包装清单】
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| P1003-1 | BCA试剂A | 100ml |
| P1003-2 | BCA试剂B | 3ml |
| P1003-3 | 蛋白标准（BSA） | 30mg |
| P1003-4 | 蛋白标准配制液 | 1.5ml |
| - | 说明书 | 1份 |
【使用说明】
1、蛋白标准品的准备
A、取1.2ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准（30mg BSA）中，充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即使用，也可以-20ºC长期保存。
B、取适量25mg/ml蛋白标准，稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20µl-25mg/ml蛋白标准，加入980µl 稀释液即可配制成0.5mg/ml蛋白标准（现配现用或者-20℃保存）。蛋白样品在什么溶液中，标准 品也宜用什么溶液稀释，也可以用0.9% NaCl或 PBS稀释标准品。
2、BCA工作液配制
A、计算所需要的总BCA 工作液体积。
总BCA工作液体积=（标准品+待测样品）×重复数×每个样品所需要的BCA工作液
B、按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(A:B=50:1)配制适量BCA工作液，充分混匀。
(例如5ml BCA试剂A加100µl BCA试剂B，混匀，配制成5.1ml BCA工作液。BCA工作液密封室温24小时内稳定)
3、蛋白浓度测定
A、将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20µl加到96孔板的标准品孔中，加标准品稀释液补足到20µl，相当于标准品浓度分别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。
| 管号 | 0.5mg/mlBSA | 稀释液体积（ul） | BSA终浓度（mg/ml） |
| A | 20 | 0 | 0.5 |
| B | 16 | 4 | 0.4 |
| C | 12 | 6 | 0.3 |
| D | 8 | 12 | 0.2 |
| E | 4 | 16 | 0.1 |
| F | 2 | 18 | 0.05 |
| G | 4 | 19 | 0.025 |
| H | 0 | 20 | 0=Blanck |
B、加适当体积样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足20µl，需加标准品稀释液补足到20µl。
C、各孔加入200µl BCA工作液，37ºC放置20-30分钟，也可以在室温放置2小时，或60ºC放置3分钟。
D、用酶标仪测定A562或540-595nm之间的其他波长的吸光度,562nm最佳。
E、根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品的蛋白浓度。
【注意事项】
1、本试剂盒可以兼容样品中高达5%的 SDS，5%的 Triton X-100，5%的 Tween20、60、80。
但本试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保 EDTA 低于 10mM，无 EGTA，二硫苏糖醇(DTT) 低于 1mM，β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于 0.01%。
2、BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。 如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。
3、低温或长期保存，若发现BCA试剂A或者试剂B有沉淀发生，请 37ºC温育并伴随搅拌促使其充溶解。如发现细菌污染，则应丢弃，避免对实验结果造成影响。
4、为了您的身体安全及健康，请穿实验服及佩戴一次性手套操作。
5、本产品仅限于科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
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