荧光定量PCR技术服务

        实时荧光定量PCR（Real-time Quantitative PCR，qRT-PCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，从而对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR技术是一次DNA定量技术的飞跃，运用该项技术，可以对DNA 、RNA样品进行定量和定性分析。

       图1.扩增曲线                                                                                                     图2.溶解曲线

1  DNA或RNA的绝对定量分析：

包括病原微生物或病毒含量的检测，转基因动植物转基因拷贝数的检测，RNAi基因失活率的检测等。 

★ 服务流程：

1.1 根据目的基因设计引物，优化实验条件。

1.2.DNA/RNA的提取

1.3.标准品和标准曲线的建立

1.4.Realtime PCR 

2. 基因表达差异分析：

比较经过不同处理的样本之间特定基因的表达差异（如药物处理、物理处理、化学处理等）、特定基因在不同时相的表达差异以及cDNA 芯片或差显结果的认证。

     ★ 服务流程：

2.1.根据目的基因设计引物。

2.2. RNA提取

2.3  cDNA合成

2.4   Realtime PCR

★ 客户提供：

1.进行mRNA表达量分析时，如果提供的材料为Total RNA，请寄送足量的并且保证纯度的总RNA(浓度在200 ng/μl以上，体积在20 μl以上，纯度A260/280在1.8-2.0间)。如果目的基因表达量低时，应尽量提供更高浓度的总RNA。 

2.如果提供的材料为细胞或组织应保证材料新鲜，动物细胞数为106以上，动物组织为100 mg以上。  

★ 我们提供：实验原始数据及实验结果和方法报告单。